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英文簡稱 | NT-4 ELISA Kit | 貨號 | CS-1562E |
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規格 | 48T/96T | 保存溫度 | 2-8℃ |
包裝類型 | 盒裝液體 | 發貨地 | 上海 |
實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中NT-4 兔子神經營養因子4。用純化的NT-4 兔子神經營養因子4抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加NT-4 兔子神經營養因子4,再與 HRP 標記的NT-4 兔子神經營養因子4抗體結合,形成抗體抗原-酶標抗體復合物,經過洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的NT-4 兔子神經營養因子4呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中NT-4 兔子神經營養因子4濃度。
商品屬性:
產品名稱 | NT-4 兔子神經營養因子4elisa試劑盒 | 英文名稱 | NT-4 ELISA Kit |
貨號 | CS-1562E | 規格 | 48T/96T |
實驗目的:
本試劑盒用于測定血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中誘導型一氧化氮合成酶NT-4 兔子神經營養因子4的含量。
圖
檢測原理:
1. 抗原-抗體反應
ELISA的基礎是抗原-抗體反應。抗原是一種能夠與抗體結合的物質,而抗體則是免疫系統產生的蛋白質,能夠識別并結合抗原。抗原-抗體結合是高度特異的,因此ELISA能夠準確地檢測樣本中的抗原或抗體。
2. 酶聯免疫吸附試驗
在ELISA中,抗原或抗體被吸附在固相載體表面。常用的固相載體包括聚苯乙烯、尼龍等。載體表面經過特殊處理,可以增強其與抗原或抗體的結合能力。將酶標記的二抗加入反應體系中,二抗能夠與抗原或抗體結合,形成酶標抗原-抗體復合物。
3. 底物顯色反應
在加入底物后,酶標抗原-抗體復合物與底物發生顯色反應,產生顏色變化。底物可以是顯色劑,也可以是熒光染料。顯色反應的強度與抗原-抗體復合物的量成正比,因此可以通過測量光密度值來定量分析樣本中的抗原或抗體。
4. 終止反應
顯色反應持續一定時間后,需要加入終止液終止反應。終止液可以使酶失活,停止顯色反應。終止液一般是酸或堿溶液。
5. 檢測與分析
終止反應后,將固相載體放入多功能酶標儀中測量各孔的光密度值。通過標準曲線可以得出樣本中抗原或抗體的濃度。標準曲線是通過檢測已知濃度的標準品繪制而成的。
注意事項:
1.NT-4 兔子神經營養因子4elisa試劑盒試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD 值大于標準品孔一孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
ELISA技術原理:
以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來。
1. 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
2. 結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
3. 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。
4. 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應,再加入酶標記 的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。
5. 此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
6. 加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量 與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定 性或定量分析,測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水 平),并且重復性好。
商品屬性:
英文名稱 | NT-4 ELISA Kit | 規格 | 48T/96T |
貨號 | CS-1562E | 類別 | 兔elisa試劑盒 |
包 裝 | 盒裝液體 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
操作注意事項:
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
實驗規則:
1、要保證移液槍的準確性,誤差不能超過2%,可用水和電子天平進行確定,但有專業人員進行矯正。
2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支,吸取不同的液體后,要更換槍頭,即使是吸取標準品時。
3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩定。
4、實驗時,要使底物避光保存。
5、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
6、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
7、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
8、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體,也可以用酶標儀的晃動功能。
9、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。
10、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*,沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
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