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規格 | 5×105Cells/T25培養瓶 | 組織來源 | 小腸組織 |
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貨號 | CS-X2825 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
產品信息:
貨號 | CS-X2825 | 組織來源 | 小腸組織 |
傳代特性 | 可傳5代左右;3代以內狀態 | 培養基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
培養條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% | 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
商品介紹:
產品名稱:人小腸平滑肌細胞 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 人小腸平滑肌細胞分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內,上連胃幽門,下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關重要的,因為食物經過小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后,基本上完成了消化過程,同時營養物質被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點是管壁有環形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切;構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似,絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能,其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細胞的收縮是負責腸蠕動的動力,促使食物向下運動。小腸平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。小腸平滑肌肉瘤是起源于小腸壁肌層、黏膜下肌層和腸壁血管平滑肌的惡性腫瘤,是小腸結締組織惡性腫瘤中最常見的一種。因此,體外小腸平滑肌細胞的培養對研究小腸平滑肌肉瘤提供了基礎和前提。此外,體外培養細胞,由于影響因素較為單一,是研究細胞功能以及相應的細胞信號轉導機制的基礎。 5.方法簡介: 公司實驗室分離的人小腸平滑肌細胞采用yi蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 公司實驗室分離的人小腸平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態 成纖維細胞樣 傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態 消化液 0.25%yi蛋白酶 培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
細胞保存方法:
(一)細胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養液;
2. 取對數生長期的細胞,去除舊培養液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入適量(覆蓋培養皿表面)把單層生長的細胞消化下來;
4. 離心1000rpm,5min;
5. 去除,加入適量配制好的凍存培養液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數,調節凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;
6. 將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作者;
8. 凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/ min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內。
注意事項:
1)、欲冷凍保存之細胞應在生長良好且存活率高之狀態,約為80~90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質,應在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產生。
2)、細胞在液氮中可長期凍存無,而不會影響細胞活力;在-70度可保存數月。
3)、注意冷凍保護劑之品質。DMSO應為試劑級等級,無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小體積分裝,4 ℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應為試劑級等級,以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應高滲,可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化,可換用10%甘油凍存。
公司正在出售的產品:
小鼠卵巢顆粒細胞 | 人磷脂酰肌醇抗體IgG(PI IgG)ELISA檢測試劑盒 |
BHT101 (人甲狀腺癌細胞 | 人鈣調磷suanmei(CaN)檢測試劑盒 |
BT-B (人膀胱癌細胞) | 人抗小腦(CE)自身抗體檢測試劑盒 |
C643 (人甲狀腺癌細胞) | 雞熱休克蛋白70(HSP-70) 檢測試劑盒 |
CAL-62 (人甲狀腺癌細胞 | 倍贊氏金蠅PCR試劑盒 |
CEM/C1 (人急性淋巴細胞白血病細胞) | 桔青霉PCR試劑盒 |
CoC1 (人卵巢癌細胞) | 蛇形毛圓線蟲PCR檢測試劑盒 |
CTLA4 Ig-24 (中國倉鼠卵巢細胞) | 鴿痘病毒PCR檢測試劑盒 |
DB (彌漫大B細胞淋巴瘤細胞) | 火雞沙門氏菌PCR試劑盒 |
EA.hy926 (人臍靜脈細胞融合細胞) | 桑寄生探針法PCR鑒定試劑盒 |
F81 (貓腎細胞) | 雙芽巴貝斯蟲PCR檢測試劑盒 |
H9 (人T淋巴細胞系) | 雞痘病毒PCR試劑盒 |
GBC-SD (人膽囊癌細胞) | 人小腸平滑肌細胞霍亂弧菌O(VC O)核suan檢測試劑盒 |
HC11 (小鼠乳腺上皮細胞) | 鼠疫耶爾森菌鼠疫桿菌PCR檢測試劑盒 |
HCT-8 [HRT-18] (人回盲腸癌細胞) | 差異脲原體PCR檢測試劑盒 |
操作步驟:
1)、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養基,使細胞處于指數生長期。
2)、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養基、血清,逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
3)、離心收集培養之細胞,用加血清的培養基重懸起細胞,取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數細胞濃度及凍前存活率。
4)、取與細胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細胞懸液,并晃動試管,制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細胞濃度為1~5×106cells/ ml,混合均勻,分裝于已標示之冷凍保存管中,1~2 ml/vial,并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后,注明細胞名稱、代數、日期。然后進行凍存。
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