1.DMSO:
DMSO是二甲基亞砜,用途廣泛。用作乙炔、芳烴、二氧化硫及其他氣體的溶劑以及腈綸纖維紡絲溶劑。是一種即溶于水又溶于有機(jī)溶劑的極為重要的非質(zhì)子極性溶劑。對皮膚有*的滲透性,有助于藥物向人體滲透。也是一種十分重要的化學(xué)試劑。ELISA試劑盒
DMSO也是一種滲透性保護(hù)劑,能夠降低細(xì)胞冰點(diǎn),減少冰晶的形成,減輕自由基對細(xì)胞損害,改變生物膜對電解質(zhì)、藥物、毒物和代謝產(chǎn)物的通透性。
但是研究表明,DMSO存在嚴(yán)重的毒性作用,與蛋白質(zhì)疏水集團(tuán)發(fā)生作用,導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性,具有血管毒性和肝腎毒性。
DMSO是毒性比較強(qiáng)的東西,用的時(shí)候要避免其揮發(fā),要準(zhǔn)備1%-5%的氨水備用,皮膚沾上之后要用大量的水洗以及稀氨水洗滌.zui為常見的為惡心、嘔吐、皮疹及在皮膚、和呼出的氣體中發(fā)出大蒜、洋蔥、牡蠣味。
吸入:高揮發(fā)濃度可能導(dǎo)致頭痛,暈眩和鎮(zhèn)靜。
皮膚:能夠灼傷皮膚并使皮膚有刺痛感,如同所見的皮疹及水泡一樣。若二甲基亞砜與含水的皮膚接觸會(huì)產(chǎn)生熱反應(yīng)。要避免接觸含有毒性原料或物質(zhì)的二甲基亞砜溶液,因其毒性不為人所知,而二甲基亞砜卻可能會(huì)滲入肌膚,在一定條件下會(huì)將有毒物質(zhì)代入肌膚。ELISA試劑盒
吸收:吸收危險(xiǎn)性很低。
2.EB:EB(Ethidium bromide,溴化乙錠)
溴化乙錠是一種高度靈敏的熒光染色劑,用于觀察瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠中的DNA。溴化乙錠用標(biāo)準(zhǔn)302nm 紫外光透射儀激發(fā)并放射出橙紅色信號(hào),觀察瓊脂糖凝膠中DNAzui常用的方法是利用熒光染料溴化乙錠進(jìn)行染色,溴化乙錠含有一個(gè)可以嵌入DNA堆積堿基之間的一個(gè)三環(huán)平面基團(tuán)。它與DNA的結(jié)合幾乎沒有堿基序列特異性。在高離子強(qiáng)度的飽和溶液中,大約每2.5個(gè)堿基插入一個(gè)溴化乙錠分子。當(dāng)染料分子插入后,其平面基團(tuán)與螺旋的軸線垂直并通過范德華力與上下堿基相互作用。這個(gè)基團(tuán)的固定位置及其與堿基的密切接近,導(dǎo)致與DNA結(jié)合的染料呈現(xiàn)熒光,其熒光產(chǎn)率比游離溶液中染料有所增加。DNA吸收254nm處的紫外輻射并傳遞給染料,而被結(jié)合的染料本身吸收302nm和366nm的光輻射。這兩種情況下,被吸收的能量在可見光譜紅橙區(qū)的590nm處重新發(fā)射出來。由于溴化乙錠-DNA復(fù)合物的熒光產(chǎn)率比沒有結(jié)合DNA的染料高出20-30倍,所以當(dāng)凝膠中含有游離的溴化乙錠(0.5ug/ml)時(shí),可以檢測到少至10ng的NDA條帶。溴化乙錠可以嵌入堿基分子中,導(dǎo)致錯(cuò)配。溴化乙錠是強(qiáng)誘變劑,具有高致癌性!會(huì)在60-70度是蒸發(fā)(所以不要在膠太熱的時(shí)候加,或者應(yīng)該加到液體里,0.5ug/ml,染色半小時(shí))(當(dāng)EB加得過多時(shí),也可以在室溫用水將已染色的凝膠浸泡20min以降低未結(jié)合的EB引起的背景熒光)。
溴化乙錠溶液的凈化處理:由于溴化乙錠具有一定的毒性,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,應(yīng)對含EB的溶液進(jìn)行凈化處理再行棄置,以避免污染環(huán)境和危害人體健康。ELISA試劑盒
(1) 對于EB含量大于0.5mg/ml的溶液,可如下處理:
①將EB溶液用水稀釋至濃度低于0.5mg/ml;
②加入一倍體積的0.5mol/L KMnO4,混勻,再加入等量的25mol/L HCl,混勻,置室溫?cái)?shù)小時(shí);
③加入一倍體積的2.5mol/L NaOH,混勻并廢棄。
(2)EB含量小于0.5mg/ml的溶液可如下處理:
① 按1mg/ml的量加入活性炭,不時(shí)輕搖混勻,室溫放置1小時(shí);
② 用濾紙過濾并將活性碳與濾紙密封后丟棄。