大鼠腎損傷分子1（Kim-1）ELISA試劑盒

本公司并提供各種屬的腎損傷分子1（Kim-1）ELISA試劑盒

檢測范圍:

10ng/L -100ng/L

保存條件及有效期：
1     2-8℃。
2     6個月 
 

實驗原理：
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠腎損傷分子 -1（Kim-1）水平。用純化的大鼠腎損傷分子-1（Kim-1）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入腎損傷分子-1，再與 HRP標記的 Kim-1抗體結合，形成抗體 -抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在 HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腎損傷分子 -1（Kim-1）呈正相關。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度（ OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠腎損傷分子 -1（Kim-1）濃度.

樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。
2. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

注意事項：
1．用前試劑、樣品置室溫平衡不少于10分鐘
2．確定孵育的溫度，應避免溫度的變化。
3．檢查試劑是否被污染。
4．使用封板膜封口，注意每步使用新的封板膜，確定每兩步驟間，酶標板應保持濕潤。
5．吸頭盡可能一次性使用。
6．請嚴格參照說明書操作！
注意事項：
1. 在收集標本前必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。
2. 建議新鮮標本盡早檢測，對收集后及時進行檢測。1-3天左右檢測的樣本可儲存在4℃備用。如有特殊原因需要周期性收集標本，請將標本及時分裝后放在-20℃或- 70℃條件下保存，避免反復凍融。
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