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339次elisa試劑盒,人elisa試劑盒操作方法
ELISA 是一種敏感性高、特異性強、重復(fù)性好的實驗診斷方法。ELISA 試劑盒操作方法,Elisa試驗廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中,那么Elisa試驗有沒有簡單便捷的操作方法呢?
人ELISA試劑盒操作方法:用于檢測未知抗體的間接法
1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至 1~10μ g/ml,每孔加 0.1ml,4℃過夜。次日洗滌 3 次。
2.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml 于上述已包被之反應(yīng)孔中,置 37℃孵育 1 小時, 洗滌。 (同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3.于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育 30-60 分鐘,洗滌, zui后一遍用 DDW 洗滌。
4.于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的 TMB 底物溶液 0.1ml,37℃ 10~30 分鐘
5.于各反應(yīng)孔中加入 2M 硫酸 0.05ml 6.可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為 無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”“-”號表示。也可測 OD 值:在 ELISA 檢測 、 儀上,于 450nm(若以 ABTS 顯色,則 410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔 OD 值, 若大于規(guī)定的陰性對照 OD 值的 2.1 倍,即為陽性。
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