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281次 因此如用抗人IgM作為二抗,間接測定IgM抗體,必須先將標本用A蛋白或抗IgG抗體處理,以除去IgG的干擾。在臨床IgM時多采用捕獲包被法。先用抗人IgM抗體包被固相,酶聯(lián)免疫試劑盒以捕獲血清標本中的IgM(其中包括針對抗原的特異性IgM抗體和非特異性的IgM)。然后加入抗原,此抗原僅與特異性IgM相結(jié)合。繼而加酶標記針對抗原的特異性抗體。再與底物作用,呈色即與標本中的IgM成正相關。
此法常用于病毒性感染的早期診斷
1)將特異性抗原與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗原。洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。
2)加稀釋的受檢血清,保溫反應。血清中的特異抗體與固相抗原結(jié)合,形成固相抗原抗體復合物。經(jīng)洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體,酶聯(lián)免疫試劑盒血清中的其他成份在洗滌過程中被洗去。
3)加酶標抗抗體。可用酶標抗人Ig以檢測總抗體,但一般多用酶標抗人IgG檢測IgG抗體。固相免疫復合物中的抗體與酶標抗體抗體結(jié)合,從而間接地標記上酶。洗滌后,固相載體上的酶量與標本中受檢抗體的量正相關。
4)加底物顯色
本法主要用于對病原體抗體的檢測而進行傳染病的診斷。酶聯(lián)免疫試劑盒間接法的優(yōu)點是只要變換包被抗原就可利用同一酶標抗抗體建立檢測相應抗體的方法。
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