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ELISA試劑盒免疫學測定方法操作說明

時間:2014-12-3閱讀:357
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    ELISA試劑盒中有三個必要的試劑:免疫吸附劑、結合物和酶的底物等。完整的ELISA試劑盒包含以下各組分:

(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);

(2)酶標記的抗原或抗體(結合物);

(3)酶的底物;

(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標準品和控制血清(定量測定中);

(5)酶聯物(結合物)及標本的稀釋液;

(6)洗滌液;

(7)酶反應終止液。

    在ELISA試劑盒中,用作固相載體的小珠一般為直徑0.6cm的圓珠,表面經磨砂處理后吸附面積大大增加。ELISA試劑盒板孔的吸附面積約為200mm2,小珠均為1000mm2,將近ELISA試劑盒板孔的5倍。吸附面積的增大即意味著固相抗原或抗體量的增加。

   再者,球型小珠的表面弧度更有利于吸附的抗原決定簇或抗體結合位點的暴露面處于*反應狀態,因此珠式ELISA試劑盒的反應往往更為靈敏。小珠的另一特點是更易于使洗滌*,使用特殊的洗滌器,使小珠在洗滌過程中滾動淋洗,其洗滌效果遠較板孔的浸泡式為好。但由于磨砂工藝的難度較大,小珠的均一性較差。

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