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日本開發出檢測流感病毒新技術

2012-2-14  閱讀(1671)

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日本理化研究所日前宣布,其科研小組開發出一種檢測流感病毒的新技術,靈敏度相對大幅提高,可在發病后的很早階段確認感染,有助于及時防止流感蔓延. 日本理化研究所日前宣布,其科研小組開發出一種檢測流感病毒的新技術,靈敏度相對大幅提高,可在發病后的很早階段確認感染,有助于及時防止流感蔓延. 該小組的科研人員在新一期美國學術期刊《公共科學圖書館•綜合》的上報告說,此前的流感病毒檢測試劑是利用抗體辨別病毒的蛋白質,但如果發熱等感染癥狀未持續24小時,用這類方法就很難檢測出病毒,而且只能大體區分流感病毒屬于甲型還是乙型,對病毒的具體類型還需進一步分析. 理化研究所開發的新技術把流感病毒的核糖核酸(RNA)轉變成脫氧核糖核酸(DAN),在試管中增殖后檢測.病毒濃度只需達到以往檢測濃度要求底限的百分之一即可,其類型可通過檢測基因確定.臨床試驗顯示,新技術在患者發病后6至24小時內,即流感病毒尚未在人體內大量增殖時就能測出病毒,且檢測的操作時間只需約40分鐘. 研究小組指出,利用這一技術能快速測出2009年流行的甲型H1N1流感病毒.目前,該小組正準備嘗試以類似方法甄別H5N1型高致病性禽流感病毒,以期盡早發現更多種類的危險流感病毒流行跡象,防止流感蔓延

 

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.標本收集方法:
1. 血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
2. 血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
3. 尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4. 細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
5. 培養細胞
    檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
6. 組織標本
    切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

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