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勁馬承諾做到這幾點Western陰性結(jié)果也能挽救
在上海勁馬實驗設(shè)備有限公司W(wǎng)estern blot實驗中。Western blot是zui常用的實驗方法,但意義并不尋常,其結(jié)果的有無往往決定著下一步實驗的走向。當(dāng)您辛辛苦苦地花費近兩天時間提蛋白、電泳、轉(zhuǎn)印、雜交之后,顯色時卻得到了“白板”一塊,傷心沮喪之時,千萬不要輕言放棄!請務(wù)必先試試我的建議:1. 打開冰箱,看看有沒有其他顯色試劑2. 走進隔壁,換換其他實驗室的成像儀器
要想挽救Western陰性結(jié)果請先看以下幾點:
1. 試劑良莠不齊
說到試劑,國產(chǎn)、進口,那叫一個林林總總,價格差別也很大。很多實驗室老板“買得起馬,配不起鞍”,zui終選擇便宜的試劑,當(dāng)然,并不是便宜沒好貨,只是更多的時候,是一分錢一分貨。殊不知這一省,就省掉了一兩個數(shù)量級的靈敏度差異。
2.研究對象太過于復(fù)雜
您研究的對象是蛋白質(zhì),這個敵人可不簡單。其表達(dá)豐度變化跨度極大,據(jù)估計有106之巨。不僅如此,真正執(zhí)行功能的蛋白,其表達(dá)量往往極微,些許的豐度變化就能帶來生命現(xiàn)象的斗轉(zhuǎn)星移。面對這樣的復(fù)雜而狡猾的蛋白質(zhì),我們卻罕有大規(guī)模殺傷性武器,既沒有PCR般的擴增技術(shù),也沒有成熟的測序方法。無奈,依靠印跡這個還算特異性好的常規(guī)武器,其殺傷力又往往受制于儀器和試劑。
3. 儀器表現(xiàn)迥異
我們科研工作者,多為生物學(xué)出身,對儀器硬件、光學(xué)電學(xué)有著天然的不親近感。購買儀器時,更是墜入了諸多參數(shù)的謎團,面對幾十項不知所云的陌生數(shù)字,zui終要么是舉手投降,簡單地copy了其他實驗室的選擇;要么是眉毛胡子一把抓,本著“一個都不能少”的原則,教條地比較每一項參數(shù),zui后費盡心力地選他個所謂的“”。殊不知,參數(shù)有主次之分,其權(quán)重各異;即便參數(shù)相當(dāng),真真地做個對比實驗,不同廠商的“”,也會比出個一兩個數(shù)量級的靈敏度差別。因此,選擇儀器時我個人認(rèn)同那句話,“不認(rèn)廣告,認(rèn)療效”,也就是說只看關(guān)鍵指標(biāo),再加上實際使用效果的比較,相信錯不了。
也許,驚喜便這樣悄然而至,幸福就在那轉(zhuǎn)角處!對實驗而言,幸福各有不同,而不幸往往相似。這一切都是由于那該死的“靈敏度”zui初的沮喪和險些的錯過,并不*是您的過錯。千萬別被實驗折磨之余,再背負(fù)太多的自責(zé),因為原因有很多。本次文章題材來自上海勁馬實驗室供應(yīng)。索要我司產(chǎn)品目錄。及價格!
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