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大鼠胰高血糖素(GC)酶聯免疫分析試劑盒操作步驟

2011-6-22  閱讀(1183)

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提  供  商 上海勁馬實驗設備有限公司 資料大小 32KB
資料類型 WORD 文檔 資料圖片
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使用目的:

大鼠胰高血糖素(GC)酶聯免疫分析試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中胰高血糖素(GC含量。

操作步驟

1.         標準品的稀釋:大鼠胰高血糖素(GC)酶聯免疫分析試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

80pg/ml

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

40pg/ml

4號標準品

150μl5號標準品加入150μl標準品稀釋液

20pg/ml

3號標準品

150μl4號標準品加入150μl標準品稀釋液

10pg/ml

2號標準品

150μl3號標準品加入150μl標準品稀釋液

5pg/ml

1號標準品

150μl2號標準品加入150μl標準品稀釋液

 

 

2.         加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3.         溫育:用封板膜封板后置37溫育30分鐘。  

4.         配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6.         加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7.         溫育:操作同3。

8.         洗滌:操作同5。

9.         顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37避光顯色15分鐘.

10.     終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11.     測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

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