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RNA/DNA提取
血清
ATCC細胞
質粒
細胞系

人B族鏈球菌抗體(Strep-B Ab) 酶聯免疫分析 試劑盒使用方法

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人B族鏈球菌抗體(Strep-B Ab) 酶聯免疫分析 試劑盒使用說明書
 本試劑盒僅供研究使用。 
 96T
使用目的:
本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中 B 族鏈球菌抗體(Strep-B Ab) 表
達。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中人 B 族鏈球菌抗體(Strep-B Ab) 表達。用純化的
抗原包被微孔板,制成固相抗原,可與樣品中 B 族鏈球菌抗體(Strep-B Ab) 相結合,經
洗滌除去未結合的抗原和其他成分后再與 HRP 標記的抗原結合,形成抗原-抗體-酶標抗原
復合物,經過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸
的作用下轉化成*終的黃色。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),與 CUTOFF
值相比較,從而判定標本中人 B 族鏈球菌抗體(Strep-B Ab) 的存在與否。
試劑盒組成 
30 倍濃縮洗滌液 20ml× 瓶 7 終止液 6ml× 瓶
2 酶標試劑 6ml× 瓶 8 陽性對照 0.5ml× 瓶
3 酶標包被板 2 孔×8 條 9 陰性對照 0.5ml× 瓶
4 樣品稀釋液 6ml× 瓶 0 說明書 份
5 顯色劑 A 液 6ml× 瓶 封板膜 2 張 
6 顯色劑 B 液 6ml×/瓶 2 密封袋 個
標本要求 
.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
人B族鏈球菌抗體(Strep-B Ab) 酶聯免疫分析 試劑盒操作步驟
. 編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照
孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2. 加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50µl。然后在待測樣品孔先
加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 0µl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不
觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。 
4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此
重復 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。 
7. 溫育:操作同 3。
8. 洗滌:操作同 5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
5 分鐘.
0. 終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止
液后 5 分鐘以內進行。
操作程序總結:
計算和結果判定:
 試驗有效性:陽性對照孔平均值≥.00; 陰性對照平均值≤0.0 
 臨界值(CUT OFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.5 
 陰性判定:樣品 OD 值< 臨界值(CUT OFF)者為 B 族鏈球菌抗體(Strep-B Ab) 陰

 陽性判定:樣品 OD 值≥ 臨界值(CUT OFF)者為 B 族鏈球菌抗體(Strep-B Ab) 陽

。 
人B族鏈球菌抗體(Strep-B Ab) 酶聯免疫分析 試劑盒注意事項
.操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。
2.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 5-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未
用完,板條應裝入密封袋中保存。
3.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物請避光保存。
6.試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準,使用雙波長檢測時,參考波長為 630nm 
7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為 2M 的硫酸,使用時必須
注意安全。
保存條件及有效期
.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 個月

 

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