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人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒?操作步驟

時間:2022/3/15閱讀:676
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人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒操作步驟:


1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。


2.  設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;


3.  樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。


4.  除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。


5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。


6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。


7.  每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。


[實驗結果計算]


以所測標準品的OD值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。

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