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錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體實驗前準備

時間:2022/4/12閱讀:920
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錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體實驗前準備:


一抗稀釋的準備:


方法1. 實驗前,將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋(或PBS稀釋),將稀釋后的抗體分裝5-10支(20ulx5支或10ulx10支),放入-20℃保存,用一支拿一支,避免反復(fù)凍溶。


方法2. 實驗前,也可將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋50ul(或PBS稀釋50ul)成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存,用多少吸多少。


方法3. 預(yù)試驗可做幾個梯度1:100、200、400背景高還可做上去,選一個適合的稀釋比例,再正式做。工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。


二)DAB顯色液的制備實驗準備:在1毫升試劑E(DAB 底物液)中,加入1滴(約50微升)試劑D(DAB濃縮液),混合均勻,即配成DAB工作液。此溶液必須現(xiàn)用現(xiàn)配,配好后避光保存,6小時內(nèi)使用,剩余的液體應(yīng)棄去。標(biāo)本顯色時間一般為室溫 5~20分鐘,請在顯微鏡下觀察顯色的情況,顯色充分后應(yīng)將標(biāo)本及時脫水封固。


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