大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)elisa試劑盒雙抗體夾心法操作步驟:
1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ **。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M**0.05ml。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+"、“-"號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)elisa試劑盒他elisa試劑盒:
F3988-A | 大鼠白介素11(IL-11)elisa試劑盒 |
F3988-B | 大鼠白介素11elisa試劑盒 |
F3989-A | 大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)elisa試劑盒 |
F3989-B | 大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4elisa試劑盒 |
F3990-A | 大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)elisa試劑盒 |
F3990-B | 大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3elisa試劑盒 |
F3991-A | 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D(VEGF-D)elisa試劑盒 |
F3991-B | 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子Delisa試劑盒 |
F3992-A | 大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)elisa試劑盒 |
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)elisa試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)。已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品和*標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。