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實(shí)驗(yàn)室常見實(shí)驗(yàn)技術(shù)介紹
點(diǎn)擊次數(shù)：975 發(fā)布時(shí)間：2018-7-16
細(xì)胞培養(yǎng)、分子克隆、免疫印跡法 (Western blotting,WB) 是生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)室及基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室中常見的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。廣泛應(yīng)用于高校、科研院所實(shí)驗(yàn)室，基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室，生物產(chǎn)業(yè)相關(guān)企業(yè)中。
一、細(xì)胞培養(yǎng)
也叫細(xì)胞克隆技術(shù)，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。
不論對于整個(gè)生物工程技術(shù)，還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說，細(xì)胞培養(yǎng)都是一個(gè)*的過程，細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的大規(guī)模克隆。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡單的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞，這是克隆技術(shù)*的環(huán)節(jié)，而且細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆。通過細(xì)胞培養(yǎng)得到大量的細(xì)胞或其代謝產(chǎn)物。因?yàn)樯锂a(chǎn)品都是從細(xì)胞得來，所以可以說細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是生物技術(shù)中核心、基礎(chǔ)的技術(shù)。
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二、分子克隆
是在分子水平上提供一種純化和擴(kuò)增特定DNA片段的方法。
常含有目的基因，用體外重組方法將它們插入克隆載體，形成重組克隆載體，通過轉(zhuǎn)化與轉(zhuǎn)導(dǎo)的方式，引入適合的寄主體內(nèi)得到復(fù)制與擴(kuò)增，然后再從篩選的寄主細(xì)胞內(nèi)分離提純所需的克隆載體，可以得到插入DNA的許多拷貝，從而獲得目的基因的擴(kuò)增。
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三、免疫印跡法 (Western blotting，WB)
一種將高分辨率凝膠電泳和免疫化學(xué)分析技術(shù)相結(jié)合的雜交技術(shù)。
免疫印跡法具有分析容量大、敏感度高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，是檢測蛋白質(zhì)特性、表達(dá)與分布的一種常用的方法，如組織抗原的定性定量檢測、多肽分子的質(zhì)量測定及病毒的抗體或抗原檢測等。 免疫印跡法(immunoblotting test,IBT)亦稱酶聯(lián)免疫電轉(zhuǎn)移印斑法(enzyme linked immunoelectrotransfer blot,EITB),因與Southern早先建立的檢測核酸的印跡方法 Southern blot 相類似，亦被稱為Western-blot.
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